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电泳制胶操作步骤

电泳制胶操作步骤

电泳制胶操作步骤通常包括以下几个步骤:

1. 准备琼脂凝胶溶液 :

根据所需琼脂糖凝胶的浓度称取琼脂糖粉末。

将琼脂糖粉末加入电泳缓冲液中,如TAE或TBE。

微波炉加热至琼脂糖完全融化,并确保溶液透明。

2. 浇注凝胶 :

将融化后的琼脂糖溶液冷却至约60-70°C。

如果需要,可以加入染料如Gelred以提高可视化效果。

将冷却的琼脂糖溶液倒入制胶模具中。

轻轻敲击模具以去除气泡。

3. 插入梳子 :

将梳子垂直插入模具中,梳齿与模具底部保留约1mm的间隙。

4. 灌注电泳槽 :

将模具放入电泳槽中,确保样品孔位于电场负极。

向电泳槽中加入电泳缓冲液,直至液面覆盖过胶面。

5. 静置凝固 :

室温下静置,直至琼脂糖凝胶完全凝固。

6. 拔出梳子 :

凝胶凝固后,小心拔出梳子。

7. 准备样品 :

将待检测样品与DNA loading buffer混合。

通常,样品需要变性处理,如加热煮沸。

8. 上样 :

使用微量移液器将样品小心加入凝胶的样品孔中。

9. 电泳 :

将电泳槽放入电泳仪中,并接通电源。

根据DNA片段大小选择合适的电压和电泳时间。

10. 观察结果 :

电泳结束后,取出凝胶,在紫外光下观察条带。

以上步骤是电泳制胶的基本流程,具体细节可能会根据实验要求和设备差异有所调整。请根据实验的具体需求进行操作

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