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荧光探针技术的原理

荧光探针技术的原理

荧光探针的原理基于荧光现象,即某些物质在吸收特定波长的光后,会发射出波长更长的光。这一现象称为斯托克斯位移,是荧光探针能够被用于检测和分析的基础。荧光探针通常由两部分组成:一个能够吸收特定波长光的发色团(Chromophore)和一个能够影响发色团荧光性质的周围环境或基团(如偶联的配体或小分子)。当发色团吸收激发光后,它会跃迁到激发态,然后迅速回到基态,并在这一过程中发射出荧光。周围环境或基团的存在会影响发色团的荧光强度、波长和寿命,从而使得荧光探针能够对特定的分子事件做出反应。

荧光探针技术广泛应用于生物医学研究中,通过将荧光分子与生物分子相互作用,利用产生的荧光信号来检测和分析生物分子的存在、分布和功能。荧光探针技术可以用于定量分析、分子成像以及研究细胞内的特定分子、过程或环境条件。

荧光探针的种类繁多,包括自发荧光探针和诱导荧光探针。自发荧光探针在紫外光或可见光激发下能发出荧光,如荧光素、荧光素钠等;诱导荧光探针则需要特定的激发光源才能产生荧光,如罗丹明B、碘化丙啶等。

荧光探针技术还包括基于荧光共振能量转移(FRET)原理的技术,其中荧光基团与淬灭基因的距离接近时,会发生荧光能量的转移,淬灭基团吸收荧光基团激发荧光后使其不发荧光,当荧光基团与淬灭基团分离时,淬灭作用消失,荧光产生。

荧光探针还可以用于研究细胞内线粒体的动态变化,通过将荧光分子与线粒体结合,利用荧光信号来研究线粒体的状态和功能。

荧光探针技术也被应用于无损检测领域,如荧光渗透探伤,通过将含有荧光染料的渗透剂渗入工件表面的微小裂纹中,然后用吸附剂清洗,使缺陷内的荧光油液渗出表面,在紫外线灯照射下显现荧光斑点或条纹,从而发现和判断缺陷

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